Патогенез основных свойств возбудителей вич

Такой препарат пропускают через цитофлюориметр, который регистрирует флюоресценцию. МЕТОДЫ РЕГИСТРАЦИИ ЦИТОПАТОГЕННЫХ ЭФФЕКТОВ ВИЧ Существует три типа цитопатогенных эффектов цитонекроз или цитолиз, образование синцития и грубые или тонкие изменения нормальной дифференцировки клетки. Цитонекроз регистрируют под микроскопом после добавления к аликвоте суспензии клеток суправитальных красителей типа трипанового синего, которые мгновенно проникают в нежизнеспособные клетки и не проникают по крайней мере в течение 15-30 мин. в жизнеспособные клетки.

Препарат быстро просматривают под микроскопом в счетной камере и подсчитывают жизнеспособные и нежизнеспособные клетки. Если повреждение клеток приводит к их лизису, то это регистрируется по убыли общего числа клеток в культуре. Некоторые исследователи предпочитают колорометрический анализ цитонек- ротического действия вирусов Neurath A. R.Strick N.1990. Выполняется он следующим образом. В лунки культуральных микропанелей раскапывают суспензию клеток, известных своей чувствительностью к цитонекротическому действию ВИЧ, например, линии МТ-2, по 5х103 клеток на лунку в объеме 25 мкл.

В культуральную среду добавляют полибрен 1 мкгмл и вносят аликвоты материала, испытуемого на содержание ВИЧ. Смесь инкубируют при 37С в течение 1 часа, после чего доводят объем культуральной средой до 200 мкл и культивируют в течение 5 дней при 37С. По истечении этого времени в лунки вносят краситель — ХХЕ-тетразолиевую соль инкубируют еще 4 часа. Этот краситель проникает только в нежизнеспособные клетки из него внутриклеточно образуется нерастворимое соединение формазан, что количественно оценивается колорометрически. Тест на синцитиообразующее действие ВИЧ.

 
Статья прочитана 28 раз(a).
 

Еще из этой рубрики:

 

Последние Твитты

Loading

Архивы

Наши партнеры

Читать нас

Связаться с нами

Наши контакты

Тел.      

Skype  

ICQ