Иследования второстепенных структур возбудителей вич

1 млн. живых клеток, подозреваемых на инфицированность ВИЧ, инкубируют со специфическими анти-ВИЧ антителами 45 мин. при 4С в PBS с 2 FCS и 0. 05 азида натрия. Затем клетки трижды отмывают инкубируют в течение 45 мин. при 4С с мечеными биотином анти-иммуноглобулиновыми антителами. Отмывают инкубируют с конъюгатом авидина с FITC.

Клетки отмывают и фиксируют в 1 растворе параформальдегида с целью инактивации инфекционности возможного ВИЧ. Такой препарат пропускают через цитофлюориметр, который регистрирует флюоресценцию. МЕТОДЫ РЕГИСТРАЦИИ ЦИТОПАТОГЕННЫХ ЭФФЕКТОВ ВИЧ Существует три типа цитопатогенных эффектов цитонекроз или цитолиз, образование синцития и грубые или тонкие изменения нормальной дифференцировки клетки.

Цитонекроз регистрируют под микроскопом после добавления к аликвоте суспензии клеток суправитальных красителей типа трипанового синего, которые мгновенно проникают в нежизнеспособные клетки и не проникают по крайней мере в течение 15-30 мин. в жизнеспособные клетки. Препарат быстро просматривают под микроскопом в счетной камере и подсчитывают жизнеспособные и нежизнеспособные клетки.